熒光原位雜交(石蠟切片)

       熒光原位雜交（FISH）是一種使用僅與染色體的那些部分高度序列互補性結合的熒光探針的分子細胞遺傳學技術。它是由生物醫學研究人員在20世紀80年代初開發的，用于檢測和定位染色體上特定DNA序列的存在與否。熒光顯微鏡可用于找出熒光探針與染色體結合的位置。FISH通常用于發現DNA中的特定特征，用于遺傳咨詢，藥物和物種鑒定。FISH也可用于檢測和定位細胞，循環腫瘤細胞和組織樣品中特定的RNA靶標（mRNA，lncRNA和miRNA）。

  一、試劑配制

  1.變性液：甲酰胺70%；2×SSC；0.1mM EDTA。

  2.雜交緩沖液：300ul甲酰胺；12ul 50×Denhardts；120ul 50%葡聚糖硫酸酯；；10ul RNA探針及49ul的無RNA酶的去離子水。

  3.20×SSC：175.3g/L氯化鈉；88.2g/L的檸檬酸鈉；調pH值7.0；高壓蒸汽滅菌備用，使用時按照需求進行稀釋。

  4.WS-Ⅰ：甲酰胺50%(V/V)；20×SSC 10%(V/V)；DEPC水40%(V/V)。

  5.WS-Ⅱ：4×SSC；0.05%Tween-20

  6.WS-Ⅲ：4×SSC

  以上所有試劑均用0.1%的DEPC水（焦炭酸二乙酯）配制。